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植物培養(yǎng)基的配制操作步驟及保存方法,別錯過了!

  • 發(fā)布日期:2020-04-24      瀏覽次數(shù):3254
    •        植物培養(yǎng)基好比土壤,是組織培養(yǎng)中離體材料賴以生存和發(fā)展的基地。因此,在組織培養(yǎng)的各個環(huán)節(jié)中,應著重掌握培養(yǎng)基,了解它的組成和配制方法。
        植物培養(yǎng)基的配制操作步驟:
       ?、俑鶕?jù)配方要求,用量筒或移液管從每種母液中分別取出所需的用量,放入同一燒杯中,并用粗天平稱取蔗糖、瓊脂放在一邊備用。
       ?、趯ⅱ僦蟹Q好的瓊脂加蒸餾水300~400毫升,加熱并不斷攪拌,直至煮沸溶解呈透明狀,再停止加熱。
       ?、蹖ⅱ僦兴〉母鞣N物質(包括蔗糖),加入煮好的瓊脂中,再加水至1000毫升,攪拌均勻,配成培養(yǎng)基。
       ?、苡?N的氫氧化鈉或鹽酸,滴入③中的培養(yǎng)基里,每次只滴幾滴,滴后攪拌均勻,并用pH試紙測其pH值,直到將培養(yǎng)基的pH值調到5.8。
       ?、輰⑴浜玫呐囵B(yǎng)基,用漏斗分裝到三角瓶(或試管)中,并用棉塞塞緊瓶口,瓶壁寫上號碼。瓶中培養(yǎng)基的量約為容量的1/4或1/5。
        培養(yǎng)基的成分比較復雜,為避免配制時忙亂而將一些成分漏掉,可以準備一份配制培養(yǎng)基的成分單,將培養(yǎng)基的全部成分和用量填寫清楚。配制時,按表列內容順序,按項按量稱取,就不會出現(xiàn)差錯。成分單的格式與內容見表9-2。
        植物培養(yǎng)基的保存方法:
        培養(yǎng)基配制完畢后,應立即滅菌。培養(yǎng)基通常應在高壓蒸汽滅菌鍋內,在汽相120℃條件下,滅菌20分鐘。如果沒有高壓蒸汽滅菌鍋,也可采用間歇滅菌法進行滅菌,即將培養(yǎng)基煮沸10分鐘,24小時后再煮沸20分鐘,如此連續(xù)滅菌三次,即可達到*滅菌的目的。
        經過滅菌的培養(yǎng)基應置于10℃下保存,特別是含有生長調節(jié)物質的培養(yǎng)基,在4~5℃低溫下保存要更好些。含吲哚乙酸或赤霉素的培養(yǎng)基,要在配制后的一周內使用完,其它培養(yǎng)基多也不應超過一個月。在多數(shù)情況下,應在消毒后兩周內用完。
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